目的探讨酶联免疫吸附法（ELISA）、核酸检测法(NAT）在血站检测血液乙肝表面抗原的应用结果。方法选取2018年1月-2019年6月期间血站血液标本乙肝病毒筛查的献血者28719例进行研究，分别应用酶联免疫吸附法、核酸检测法检测血液乙肝表面抗原。比较两方法检测结果的阳性率。结果：核酸检测法检测阳性率高于酶联免疫吸附法，P＜0.05；酶联免疫吸附法检测表面抗原窗口期是（41.59±0.97）d，核酸检测法检测乙肝病毒窗口期是（26.43±0.87）d，两种检查方式窗口期比较，差异有统计学意义，P＜0.05。结论血站无偿献血者标本的血液乙肝表面抗原检测方法中，酶联免疫吸附法以及核酸检测方法均可用于乙肝病毒检测，诊断中各有优缺点，但核酸检测方法诊断准确性高于酶联免疫吸附法，可结合实际情况将两种检测结果结合，以更好地提高血液检测准确性，减少输血感染乙肝病毒的风险。